(1)

SARSウイルス検査を実施する施設：
SARSコロナウイルスに関する特異的検査については、原則として、一次検査は検査可能な全国の地方衛生研究所もしくはそれに準じる機関（以下「地衛研」）及び医療機関において行う。確認検査及び血清抗体検査は、国立感染症研究所（以下「感染研」）ウイルス第三部において行う。また、SARSコロナウイルス以外の既知の病原体の検査は、地衛研、病院検査部等で行う。

WHO：SARS：診断検査の入手状況と検査方法の実際（5月1日 ５訂）
・臨床検査結果の解釈に関する提言
・SARSの臨床検査に対する提言
http://idsc.nih.go.jp/others/sars/update45-lab.html を参照のこと。

(2)

SARSコロナウイルス検査対象者（検査を実施すべきと考えられる者）：
●「SARS流行期」（世界の何処かの国或いは地域でＳＡＲＳの地域内伝播が確認されている時期）においては、感染症法上の一類感染症の疑似症に該当する者。
ただし、疑似症の判断基準にある“38℃以上の発熱”については、解熱剤等の使用者、高齢者、基礎疾患の有る者、発病から日数が経過している者などでは38℃未満のことがあり得る。また、“発病前10日以内の感染暴露の可能性”については、多くのSARS患者では潜伏期が2〜10日であるものの、10日以上の者も例外的に報告されている。さらに、流行期においては、疑似症の診断基準を満たす以前の発熱前駆期にも検査を考慮することが必要になることがある。そのため検査の実施に関しては、発生状況に応じ各自治体において柔軟に対応することが望ましいと考える。
●「SARS非流行期」（SARS患者が世界中のどの国・地域でも確認されていない時期）においては、SARSは結核等と同様、肺炎の鑑別診断のひとつとして考えるべきであり、以下のＡ〜Ｃの要因から検討し、□以下に示す１、２、３のいずれかの場合に該当する者。

１：　Ａ、Ｂ、Ｃすべてを満たす場合
２：　Ａ、Ｂを満たし、Ｃを満たさないが、以下のa）、b）のいずれかを満たす場合

３：　Ａ、Ｃを満たし、Ｂが不明だが、症状がSARSの臨床像に矛盾せず、適切と考えられる治療によっても72時間以上改善傾向が認められず、また発症前に肺炎患者との疫学的リンクが濃厚な場合

SARSコロナウイルス検査対象者については、
　　http://idsc.nih.go.jp/others/sars/update99-GL.html
WHOの定めるSARSアラートについては、
　　http://idsc.nih.go.jp/others/sars/sars03w/04who.html
を参照のこと。

（3）

SARSコロナウイルス以外の病原体検査：
SARSが疑われる患者について、原則的には地衛研もしくは病院検査部において、BSLレベル２以上の実験施設でBSLレベル３の病原体に対する実験手技で、既知の肺炎を起こす（異型肺炎含む）病原体の一次スクリーニングを行う。これには、一般細菌培養、迅速診断法（連鎖球菌など一般細菌、レジオネラ、クラミジア、マイコプラズマ、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、RSウイルスその他について、地域における患者発生状況を考慮して、必要な病原体について検討する）、血清学的方法（マイコプラズマ、クラミジア）を含む。

（4）

SARSコロナウイルスの検査対応：

(4)-a

SARSコロナウイルスの分離：
ウイルス分離が可能なBSLレベル３施設を有する地衛研では、下記マニュアルを参照し、SARSコロナウイルスを目的としたウイルス分離を行う。この際、必ず検体の一部を−70℃以下にて保存する。SARSコロナウイルス分離に使用する標準的な培養細胞はVeroE6とする。検査結果は陰性陽性にかかわらず感染症情報センターに連絡し、CPEが出現した場合には培養上清及び保存してある当該検体（オリジナルの検体）を感染研ウイルス三部に送付する。地衛研においてウイルス分離が困難である場合は、近隣の地衛研と協議の上、委託等を行う。感染研に検体を送付する場合は、原則として行政検査として「５．検体受付」に基づいて実施する。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ウイルス分離マニュアル：SARSコロナウイルス検出のためのウイルス分離用検体の採取・処理法およびウイルス分離（国立感染症研究所ウイルス三部第一室）
http://idsc.nih.go.jp/others/sars/update56-c.html　参照。　

(4)-b

SARSコロナウイルスの遺伝子検索：
地衛研においてRT-PCR法を用いてSARSコロナウイルスの検出を行う際は、下記マニュアル を参照し実施する。LAMP法、またはRT-PCR（reverse transcription-polymerase chain reaction）法等による検査は、BSLレベル２以上の実験施設でBSLレベル３の病原体に対する実験手技で行う。検査結果は陰性陽性にかかわらず感染症情報センターに連絡し、陽性結果が得られた場合は、確認検査の為、感染研ウイルス三部に検体を送付する。地衛研において実施が困難な場合は、近隣の地衛研と協議の上、委託等を行う。感染研へ検体送付する場合は、原則として行政検査として「５．検体受付」に基づいて実施する。
PCRマニュアル：RT-PCR法によるSARSコロナウイルス遺伝子の検出（国立感染症研究所ウイルス第三部第1室）
　http://idsc.nih.go.jp/others/sars/update99-PCR.html 参照。
LAMP法については、http://loopamp.eiken.co.jp/j/index.htmlを参照。

(4)-c

SARSコロナウイルス抗体検査：
血清抗体検査は、感染研ウイルス第三部において、原則として行政検査として自治体からの依頼により行う。検体は急性期及び回復期のペアを原則とする。感染研へ検体送付する場合は「５．検体受付」に基づいて実施する。

（1）-a　ウイルス分離・遺伝子検索用

ア）

気道からの検体（鼻咽頭拭い液、喀痰等）は、特に発症10日目頃の検体が有用であるが、LAMP法やリアルタイムPCR法などのより高感度の方法を用いた場合には、発症0〜3日目でも検出できる可能性が高いので、発症早期からこれらの方法による病原検出を試みることが望ましい。しかし、陰性結果によってSARSを否定はできない。

イ）

全血、血漿、血清などの血液検体では、RT-PCR法、LAMP法などで、発症後比較的早い時期から陽性になり、発症21日目以降では陽性率が低下するとされる。

ウ）

便はRT-PCR法、LAMP法を用いると発症早期より検出できる可能があり、発症10日目頃をピーク（ほぼ100%検出可能）として、発症1カ月頃まで検出が可能である。（発症1カ月後の便の感染性については不明だが、これまでの疫学的事項では解熱後10日を過ぎて感染した事例の報告はない。）

エ）

尿はRT-PCR法、LAMP法を用いても発症早期の場合はウイルスの検出率が低く、発症10日目頃が最も検出率が高い。

（1）-b　抗体検査用

血清抗体価は発症28日目で陽性率約95％であるので、抗体価測定のための血清は (1) 発症10日目以内（通常初診時）と (2) 発症28日目以降のペアで必ず採取する。さらに、可能な限り多くの病日に血清を保存することが望ましい。（ELISA法では、発症7日目頃より抗体陽性になる場合もある。）

（２）検体毎の採取方法と検体送付方法：

全ての検体について、48時間以内に検体を輸送することが可能な場合には、検体採取後直ちに冷蔵庫に保存し、4℃（保冷剤）で輸送する。48時間以上輸送することが不可能な場合は、検体採取後直ちに施設内で-70℃以下の冷凍庫に保存し、冷凍（ドライアイス）にて輸送する。ドライアイスは密閉した容器に入れないこと。梱包の方法は（送付容器PDF版）を必ず参照のこと。
なお、感染研へ送付する場合には、各検体にラベルＩＤ（「５．検体受付」を参照）を記載したラベルを貼付する。

ア)-1 .

喀痰：通常の方法にて、自分で出せる場合には滅菌生理食塩水もしくは水道水で複数回うがいをして口腔内雑菌を除いた後、喀痰を採取してもらう（唾液の混入は可能な限り避け、口腔内常在菌の混入を抑える。）。密栓できる喀痰専用容器に入れて蓋をし、ジップ付きプラスティック袋に入れて速やかに提出する。検体採取の際は、周りの人に飛沫が飛ばないよう、区切られた部屋で行うなどの対策を講じる必要がある。採痰ブース（陰圧）があればより理想的である。人工呼吸器管理の場合には無菌的な操作のもとに、滅菌されたカテーテルを使って気管吸引液を採取する。この際にはエアロゾル生成に十分な注意と感染防御を行う。採取した吸引液はスクリューキャップ付きプラスティックチューブに入れ、蓋をした後、さらにパラフィルムにてシールする。

ア)-2.

鼻咽頭拭い液あるいは鼻咽頭洗浄液／吸引液：　通常の方法にて、鼻咽頭拭い液の場合には両方の鼻孔内を、口腔咽頭拭い液の場合には咽頭後壁および扁桃領域を拭い、スワブを2ml [注：綿棒が乾燥する状態や、大量の液体に浸した状態ではウイルスの検出が困難になる。1.5〜2 mlであれば綿棒が適度に液体に浸る程度となり、ウイルスの検出に最適である。] のウイルス輸送液体培地(ない場合は生理食塩水)を入れたスクリューキャップ付きプラスティックチューブに入れ、柄を折りとったのち、蓋をし、さらにパラフィルムにてシールする。洗浄液／吸引液の場合には、1〜1.5mlの生理食塩液を鼻腔内に注入し、その後鼻咽頭分泌物を吸引する。もう一方の鼻孔についても同様に行い、吸引液はスクリューキャップ付きプラスティックチューブに入れ、蓋をした後、さらにパラフィルムにてシールする。

イ)-1.

血清：　血液は血清に分離した後、それぞれ血清で1〜2ml程度が必要である。スクリューキャップ付きプラスティックチューブに入れ、蓋をした後、さらにパラフィルムにてシールする。
抗体検査用の血清を感染研へ送付する場合は、急性期血清は発症10日以内（通常初診時）に、回復期血清は発症28日以降に採取したペアで送付する。できれば、1週間毎など可能な限り多くの病日の血清を保存し、同時に送付していただくことが望まれる。なお、RT−PCR法等の病原体診断で陽性となった場合には、3〜4日毎に採取し送付する。また、病原体診断で陽性とならない場合でも、SARSが強く疑われる場合は、より早期から血清抗体検査を試みる。

全血：　抗凝固剤（EDTA等を用いる。ヘパリンは望ましくない。）入りの密栓できるプラスティックチューブに5ml採取し、蓋をした後、さらにパラフィルムにてシールする。

血漿：　血液を血漿に分離した後、血漿で1〜2ｍｌをスクリューキャップ付きプラスティックチューブに入れ、蓋をした後、さらにパラフィルムにてシールする。

便：　10〜50mlの便を50mlの生食に懸濁し、遠心分離後、上清2〜3mlをスクリューキャップ付きプラスティックチューブに入れ、蓋をした後、さらにパラフィルムにてシールし、ビニール袋にいれる。

尿：　50mlの尿を遠心分離し、沈査を2〜3mlの上清に懸濁させ、スクリューキャップ付きプラスティックチューブに入れ、蓋をした後、さらにパラフィルムにてシールする。

(1)

ウイルス第三部において行うSARSコロナウイルス検査は、原則としてRT-PCR法、LAMP法、ウイルス分離等の病原体診断における陽性例の確認検査及び血清抗体検査とする。

(2)

検体の受付は感染症情報センター（以下、情報センター）を通して行う。（５．検体受付を参照）

(3)

暫定的結果は、ウイルス三部がウェブシステムを通して依頼された機関等へ報告する。

(4)

情報センターでは、すべての情報をいれたデータベースを維持し、結果報告の管理も併せて行う。

(1)

ウイルス第三部による検査は、医療機関、保健所、都道府県、地衛研などの合意のもと、行政からの依頼によることを原則とする。検体受付は情報センターにおいて、以下の手順で行う。検体受付時間は、原則として休日を除く勤務時間帯（9：00〜17：00）とするが、真に緊急の場合には個別に対応する。
病院からの直接の問い合わせについては、情報センターにて、ここに記載した原則を説明することとする。

(2)

各自治体の担当者は、まず情報センターへ電話（03-5285-1111　内2535/2539）で一報を入れた後、指定のウェブシステムに患者情報、病原体検査情報等を入力する。このウェブサイトにより、各自治体と感染研は、患者に関する情報を共有する。検体に貼るラベルIDは、情報センターがこのウェブサイト上で指定する。

(3)

検体の輸送は、基本的に天然痘の検査材料の輸送方法（添付2「検査材料の採取・送付に関する追加情報」）に準ずるものとし、送付するか、持参するものとする。検体の搬入は、原則として休日を除く午前中着とし、到着予定月日と方法についてあらかじめ情報センターへ連絡しておく。但し、緊急の場合や搬入時間の多少の遅れについては、個別に情報センターを介してウイルス第三部の担当者と相談し、対応する。

(4)

情報センターは、ウイルス第三部へ検体搬入予定日時を連絡する。

なお、各自治体は、通常の行政検査依頼と同様に、文書にて国立感染症研究所長あてに検査依頼を行う。（「ウイルス行政検査について」12年5月8日　健医感発第43号　厚生省保健医療局結核感染症課長通知　参照）

（添付）検体の送付方法はこの中に詳しく説明されています。
　　　　 1.「重症急性呼吸器症候群（SARS）管理指針」(PDF 100K)

　　　　 2.「検査材料の採取・送付に関する追加情報」 (PDF 64K)