抗エンテロウイルス71型(EV71)血清で中和されないEV71の分離・同定−大阪市
(Vol.22 p 63-64)

2000年７月に､大阪市感染症サーベイランス検査の検体からVero細胞で分離された３株のウイルスは､エンテロウイルス(EV)様の細胞変性効果を示すにもかかわらず､抗EV血清で中和されなかった。これらのウイルスの血清型を検討するために､EVのVP4 をコードする遺伝子を用いて系統解析を行った結果､これらのウイルスはEV71で､そのgenotypeはA-2であることが示唆された。

2000年７月７日に採取された11カ月齢児の咽頭ぬぐい液､2000年７月18日に採取された３カ月齢児の咽頭ぬぐい液および糞便材料を､それぞれVeroおよびRD-18S細胞に接種したところ､Vero細胞においてウイルス分離陽性となった。これらのウイルス(00-219､00-260および00-261株)について､抗EVプール血清(エンテロウイルスNT試薬「生研」およびEP95)､抗コクサッキーウイルスＡ群(CA)10型､ 抗CA16型､抗EV71/BrCrおよび抗EV71/C7血清を用いてウイルス中和試験を行ったが､いずれも試験は不成立であった(表)。

石古らの報告(臨床とウイルス､27: 283-293､1999)による３種のプライマー(EVP2､ EVP4およびOL68-1)を用いて､過去６年間に当所で分離され､抗血清で同定された21血清型のEVとともに､そのVP4をコードする遺伝子をダイレクト・シークエンスで決定し､GenBankから入手した他の８血清型のEVのものを加えて､N-J法による系統解析を行った結果､00-219､ 00-260および00-261株はEV71に最も近縁であることが明らかとなった(図)。このうち､00-219株のVP4遺伝子の塩基配列は､当所で分離され､抗EV71/BrCr血清で中和されたEV71(00-168株)と同一であった。

上記３株と､1996年以降に当所で分離され､抗EV71血清で中和された８株のEV71(96-32､ 99-Ikeda､ 00-78､ 00-80､ 00-96､ 00-114､ 00-125および00-168株)およびGenBankから入手した18株のEV71(BrCr､ MS/7423/87､ KED005､ KED60､ SK026､ SK036､ 13/Sin/98､ E1387､ HO106/98､ NCKU9822､ Tainan/6092/98､ TW/2086/98､ TW/2272/98､ 1425a/98/tw､ 5142/98､ Epsom/10620/99､ Epsom/815/99およびSHZH9株)のVP4をコードする遺伝子を用いた同様の系統解析を行った結果､00-219､ 00-260および00-261株はgenotype A-2に分類された。また､当所で分離され､抗EV71血清で中和された他の８株のEV71は､99-Ikeda株のみがgenotype Bに分類され､本年度中に分離された６株を含むその他の株は､00-219､ 00-260および00-261株と同様にgenotype A-2に分類された。

以上の結果から､当所で分離された00-219､00-260および00-261株は､抗EV71/BrCrおよび抗EV71/C7血清では中和されないEV71で､そのgenotypeはA-2に分類されることが示唆された。

大阪市立環境科学研究所
久保英幸　入谷展弘　勢戸祥介　村上　司　春木孝祐

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