2003年７月､ 大阪市感染症サーベイランス検査において､ ミオクロニー様の動きを伴う手足口病患者(４歳８カ月)の咽頭ぬぐい液からエンテロウイルス71型(EV71)を検出したので報告する。
現病歴：６月30日､ 手掌・足底・臀部の発疹と38.5℃の発熱があり近医にて手足口病と診断。翌日も解熱せず嘔吐も出現。７月２日､ 一点凝視を頻回に認め､ 発熱､ 嘔吐も改善ないため､ 大阪市立総合医療センターへ入院。
入院時現症：意識清明。後部硬直あり。座位は安定しているが､ 歩行時はふらつきあり。指鼻試験は揺れがあり､ しゃべり方は突発的であった。
検査結果：＜髄液＞細胞数212(単球55％､ 多核球45％)､ 蛋白19mg/dl､ 糖98mg/dl。＜血液＞WBC 15,170/mm3､ RBC 5.13×106/mm3､ PLT 20.0×104/mm3､ CRP 0.16g/dl､ AST 36IU/l､ ALT 9IU/l､ LDH 517IU/l､ CPK 164IU/l､ TP 7.6g/dl､ フェリチン 60ng/ml。その他異常所見なし。頭部CT；特記すべき異常なし。
入院後経過：無菌性髄膜炎で嘔吐もあるので輸液のみ施行。入院中も失調様歩行・断綴的発語等の小脳症状とミオクロニー様の動きあり。小脳−脳幹脳炎(Rhombencephalitis)の合併も考え､ ７月９日､ 頭部MRI施行するも異常所見なし。７月２日の脳波では全般的にδ波が混在していた。神経症状は経過観察のみで徐々に改善し､ 麻痺など残さず退院した。
ウイルス分離：Vero細胞､ RD-18S細胞を用いてウイルス分離を試みた結果､ Vero細胞にのみエンテロウイルス様の細胞変性効果を示した。抗EVプール血清(エンテロウイルスNT試薬「生研」およびEP95)､ 抗Ａ群コクサッキーウイルス16型､ 抗EV71/BrCrおよび抗EV71/C7血清(国立感染研より分与)を用いてウイルス中和試験を行ったが､ いずれも中和不成立であった。一方､ 奈良県保健環境研究センターより分与された抗EV71血清では､ 中和が成立した。
また､ ６月には､ 39℃の発熱を伴う感染性胃腸炎患者の糞便検体から､ 同様の手法を用いてEV71を分離した。系統解析を行う目的で､ Vero細胞の培養上清からウイルスRNAを抽出後､ ３種のプライマー(EVP2､ EVP4およびOL68-1)を用いてVP4をコードする遺伝子についてRT-PCRを行った後､ ダイレクトシークエンスにより塩基配列を決定した。その結果､ 上述の手足口病患者由来と感染性胃腸炎患者由来のEV71のVP4領域の塩基配列は､ 100％一致することが判明した。
大阪市立環境科学研究所
改田 厚 入谷展弘 久保英幸 村上 司 春木孝祐
大阪市立総合医療センター
上田博章 九鬼一郎 天羽清子 外川正生 塩見正司
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