疫学調査は、患者の届出のあった医療機関を管轄する保健所において、患者に直接面会し聞き取りすることによって行われた。Ａ型肝炎ウイルス（HAV）の遺伝学的検査は、国立感染症研究所のマニュアル1) に準じ、患者糞便からRNAを抽出し、RT-PCR法を用いHAV遺伝子の一部を検出することによって実施した。さらに、PCRによって増幅されたVP1-2A領域の一部約230塩基の配列は、ダイレクトシークエンス法を用い決定し、系統樹解析などを行った。
３例のＡ型肝炎患者は女性２名（54歳・20歳）および男性１名（52歳）で、2010年４月29日〜５月19日にかけて発病していた（表）。臨床症状は、黄疸、肝機能障害、発熱、倦怠感など、Ａ型肝炎に典型的な症状を呈していた。３例中２例（患者ＡおよびＣ）は海外渡航歴を認め、患者Ａは韓国および台湾に、患者Ｃはフィリピンに渡航していた（表）。Ａ型肝炎の潜伏期間を考慮すると、患者Ａの台湾への渡航は短期間で、しかも発病直前であったことから、HAV曝露との因果関係は考えられなかった。一方、患者Ｃは非常に長期間フィリピンに滞在（2009年11月〜2010年５月18日）し、さらに帰国日の翌日に発病したことから、HAVによる曝露はフィリピン国内であったと強く示唆された。二枚貝の生食に関しては、患者Ｂのみ発病の約１カ月前に「あさりの生塩漬け」を喫食していたことが聞き取り調査で明らかになった。
Ａ型肝炎患者３例から採取された糞便を用い、RT-PCR法を実施したところ、すべてHAV遺伝子陽性となった。さらに、PCR増幅産物の塩基配列を解読し系統樹解析を行ったところ、患者ＡおよびＢ由来株は遺伝学的に近縁で、いずれも遺伝子型IIIAに分類された（図）。近年韓国では若年層を中心にＡ型肝炎が流行し、患者から検出されたHAV株の多くは遺伝子型IIIAに属したとの報告がされている2) 。このことから、患者Ａは韓国滞在期間中に、同国内で流行していたHAV株に感染した可能性が否定できないと考えられた。また、患者Ｂは、HAVに汚染した二枚貝を発病の約１カ月前に生で喫食したことが、感染の原因となったものと推察された。食材の遡り調査は、患者の記憶が定かではないことから実施できず、二枚貝の産地等の情報は得られなかった。
他方、患者Ｃ由来株は遺伝子型IAに分類され、ドイツにおいてフィリピン渡航者から検出されたHAV-DE-2007/08-196株（accession no. EU825856）およびHAV-DE-2007/08-218株（accession no. EU825857）と同じクラスターに属した（図）。また、図には示していないものの、患者Ｃ由来株はフィリピンの河川水から検出された株とも近縁であった。これらの遺伝学的解析結果は、患者Ｃがフィリピン国内でHAVに感染したことを強く裏付けるものであると考えられた。
2010年、わが国で流行しているHAV株の多くは遺伝子型IAに分類され、患者Ｃ由来株に近縁との解析結果が示されている。今後、さらに詳細で広範囲な遺伝学的解析と疫学解析が行われ、Ａ型肝炎患者急増の原因が早期に解明されることを期待する。
参考文献
1)Ａ型肝炎検査マニュアル, 国立感染症研究所ウイルス第二部, 2006
2) Lee KO, et al ., J Bacteriol Virol 39: 165-171, 2009
長野県環境保全研究所感染症部
吉田徹也 宮坂たつ子 畔上由佳 内山友里恵 笠原ひとみ 上田ひろみ 長瀬 博 藤田 暁
国立感染症研究所ウイルス第二部
石井孝司
国立医薬品食品衛生研究所食品衛生管理部
野田 衛
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