アデノ40型ウイルスを分離したので概略を報告する。

アデノ40は，1988年６月16日に発病し，感染性胃腸炎と診断された生後８ヵ月の男児の発病後３日のふん便から分離された。

ふん便中のアデノ抗原は抗アデノ41ウサギとモルモット血清を用いたサンドイッチＥＬＩＳＡ法で陽性を示した。アデノ40，41の細胞による分離はウイルスの増殖が悪く労力を要するので，われわれは愛媛衛研大瀬戸らと共同し，アデノ40，41に対する特異モノクローナル抗体を作製した。そのモノクローナル抗体を用いたＥＬＩＳＡ法で１例がアデノ40と同定された（表）。さらに組織培養による分離も試みた。ウイルス分離には荒木（ウイルス36，273-282，1986）と予研松永の方法を取り入れ，293細胞を用いたco-cultivationを行った。小試験管に0.1ml に浮遊させた293細胞（80万個）に10％ふん便乳剤遠心上清を0.5ml加え，37℃で90分間吸着（この間15〜30分間隔で攪はんしている）させ，その後軽く遠心し，上清を除き，５％ＦＣＳ加ＭＥＭを５ml加え，それをプラック培養瓶（25cm²）に移し，37℃で培養した。細胞がフルシートとなったら，２％ＦＣＳ加ＭＥＭを維持液として２〜３日間隔で液換えを行い（なお，293細胞は非常に剥がれ易いので，培養瓶を移動させる時には培養液を動かさないように静かに行い，液換えの時には細胞に培養液を直接当てないようにすること），８〜10日間観察した。２代目からはＣＰＥの認められ無かったものは20％の，ＣＰＥの認められたものは10％の細胞をとり，初代と同じ量の細胞を加え培養した。

今回のアデノ40の分離例によるウイルス増殖とモノクローナル抗体による同定成績を表に示した。３，４代目でウイルスの増殖が悪かったが，この原因については良く分からない。培養では蛍光抗体法で５代目で，ＥＬＩＳＡ法では７代目で40と同定された。また，ＣＰＥが強く現れたのはやはり７代目であった。中和試験はまだ行っていないが，９代目でやっと行えるようになったものと考えている。

なお，電顕，ＥＬＩＳＡ，ラテックス凝集反応等でアデノ陽性の検体で，40，41の型別を希望される先生がおられましたら，西尾宛に検体をお送りくだされば，型別試験を行います。



愛知県衛生研究所　西尾 治，栄 賢司，山下 照夫，石原 佑弌，磯村 思尤


　アデノ40型ウイルス分離例の増殖とモノクローナル抗体による同定