下痢原性大腸菌は，現在，その発症メカニズムにより，毒素原性大腸菌（ＥＴＥＣ），腸管組織侵入性大腸菌（ＥＩＥＣ），腸管病原性大腸菌（ＥＰＥＣ）の３型に区別されている。

近年，アメリカやカナダにおいて，Vero細胞やＨｅＬａ細胞に対して致死活性を有する毒素を産生するEscherichia coli Ｏ157：Ｈ７が出血性大腸炎の原因菌として検出され，ＥＴＥＣ，ＥＩＥＣ，ＥＰＥＣのカテゴリーに含まれない新しい下痢原性大腸菌として注目されてきている。また，E. coli Ｏ157：Ｈ７は幼児の出血性尿毒症性症候群（ＨＵＳ）の便からも検出されている。その後の研究により，本毒素は精製Shiga toxin抗毒素で中和されるのでShiga-like toxin（ＳＬＴ）と呼ばれている。そこで私達は，川崎市内の散発下痢症患者や海外帰国者由来大腸菌と当所の保存ＥＰＥＣ，ＥＴＥＣ，ＥＩＥＣ株についてＳＬＴ産生性を検討したので報告する。

方法を略述すると次のとおりである。ＣＡＹＥ培地で振盪培養した菌液の遠心上清を被検液として，マイクロタイタープレートに単層形成したVero細胞に接種し，96時間まで形態変化を観察した。陽性対照としてはE. coli Ｏ157：Ｈ７ ＥＤＬ931およびＥＤＬ932を用いた。

散発下痢症患者および海外帰国者由来大腸菌のＳＬＴ産生性は，表１に示すとおりである。すなわち，散発下痢症患者1671名由来1790株と海外帰国者232名由来240株の合計1903名由来2030株の大腸菌のＳＬＴ産生株は19株（1.0％）であり，下痢症患者由来15株（0.9％），海外帰国者由来４株（1.7％）であった。ＳＬＴ産生株の血清型は，出血性大腸炎の原因菌と同型であるO157：Ｈ７（国立予研・坂崎利一博士による）が１株分離されたのをはじめ，O26が３株，O111が２株，O128が２株のＥＰＥＣの血清型に該当する株が７株，Ｏ抗原同定中11株であった。一方，当所のＥＰＥＣ，ＥＴＥＣ，ＥＩＥＣ保存株455株のＳＬＴ産生株は10株（2.2％）で，その血清型もＯ26：４株，Ｏ111：４株，Ｏ128：２株のＥＰＥＣ血清型該当菌であった。なおＳＬＴ産生株の溶血活性は，全株とも陰性であった。

また，ＳＬＴ産生19株の毒素量をＰＢＳ（−）により，２倍段階希釈法で定量したところ，20倍から5120倍以上の毒素産生量であった。特に，Ｏ157：Ｈ７では5120倍以上，Ｏ26では2560倍，Ｏ111では1280倍であった。陽性対照ＥＤＬ931，ＥＤＬ932では5120倍以上のタイターを示していた。

次に，ＳＬＴ産生大腸菌による下痢症患者の代表的な臨床症状はそれぞれ次のとおりであった。Ｏ157の検出された症例，58歳男性：悪心＋，嘔吐＋，腹痛＋，発熱−，粘液性下痢が７〜９回／日で，便中に血液の混入は認められなかった。またＯ26の症例は，３歳女児：悪心−，嘔吐−，腹痛＋，発熱38℃，水溶性下痢６回／日。Ｏ111の症例は，10歳女児：悪心＋，嘔吐＋，腹痛＋，発熱38℃，水溶性下痢３回／日であった。今回の調査期間中，その他の症例においても出血性大腸炎やＨＵＳを疑われる症例は認められなかった。

このように，本市における下痢症患者由来大腸菌よりＳＬＴ産生株が検出され，特に出血性大腸炎の原因菌と同型菌のＯ157：Ｈ７も１名より検出された。さらに，いわゆる病原性大腸菌におけるＳＬＴ産生性は，Ｏ26，Ｏ111，Ｏ128などのＥＰＥＣ血清型より検出され，ＥＰＥＣによる下痢発現の一要因としてＳＬＴが関与していることを示唆するものであった。また，大量の検体よりＳＬＴを検定する場合，簡便で経済的なマイクロタイターカルチャー法が有用であると思われた。

今回，私達の分離したＥ. coli Ｏ157：Ｈ７はソルビット遅分解（５日目）株であり，分離に際しマッコンキー寒天培地の乳糖をソルビットに置換した変法マッコンキー寒天培地を使用した。したがって，出血性大腸菌やＨＵＳの疑われる検体の原因菌検索には，乳糖をソルビットに置換した変法マッコンキー寒天培地やＢＴＢソルビット寒天培地等を併用することを推奨したい。



川崎市衛生研究所 小川正之 中村武雄


表１．下痢症患者由来大腸菌のShiga-like toxin産生性