症例：1987年10月２日，135日齢の男児が急に哺乳力が低下し，泣き声も元気がなく，不機嫌となり，５日間にわたる便秘のため受診した。浣腸し，緑色普通便中等量を排泄したが，哺乳力低下の原因が不明のため入院となった。入院時の現症は，全身性筋緊張低下がみられ，表情に活気がなく，ウトウトしたり，イライラしたりを繰り返した。過呼吸気味であるが，心音，呼吸音に異常を認めなかった。腹部は平坦，腸雑音正常，肝脾臓腫大もみられなかった。眼は両側に軽度の眼瞼下垂があり，眼球運動制限，瞳孔不動はないが対光反射遅延がみられた。入院後も哺乳力低下，全身性筋緊張低下および便秘は改善しなかった。患児は，生後90日頃からハチミツを摂取していることや，千葉県の症例から乳児ボツリヌス症を疑い検査を実施した。

　治療は，合併症の予防に努めほ哺乳力回復まで経鼻栄養とした。症状は徐々に軽快し約２カ月後退院した。

　ボツリヌス毒素および菌の検出方法：被検材料は患者の糞便，血清および使用していたハチミツ。糞便に等量のゼラチン希釈液（0.2％ゼラチン加0.4％Na2HPO4，pH6.2）を加え乳剤にし，遠心（10,000rpm30分）して上清をとり，その0.5mlを20〜26ｇ，ＤＤＹ系マウス腹腔内に注射した。マウスが典型的な症状（腹式呼吸となり，腹壁が特異的に陥没，後肢や全身の麻痺，呼吸困難）を呈し弊死すること。さらに上清を100℃10分間加熱して無毒化することを証明し，抗毒素血清（Ａ，Ｂ，Ｃ１，Ｃ２，Ｄ，Ｅ，Ｆ型各1.0IU/ml）を用いて毒素中和試験を行った。

　菌の検出は，便懸濁液をブドウ糖・澱粉加クックトミート培地で増菌後，培養上清0.5mlをマウス腹腔内に注射し毒素を調べた。毒素が検出されれば培養液を５％卵黄加ＧＡＭ培地に接種し，30℃で２〜３日間嫌気的に培養し，疑わしい集落を簡易同定キットRapid ANA system(Innovative Diagnostic System Inc.,USA) を用いて菌の同定を行った。

　ハチミツは，20ｇに蒸留水100mlを加えて加温攪拌し遠心（10,000rpm30分）後，沈渣を増菌培養し，毒素の証明と菌の検出を試みた。血清は0.5mlをマウス腹腔内に注射し毒素の有無を調べた。

　結果：発症後20日目の糞便からＡ型ボツリヌス毒素および菌が検出された。毒素はさらに発症後50，75，102日目の糞便からも検出された（表１）。

一方，飲用していたハチミツからもＡ型ボツリヌス菌が検出された（表２）。しかし，発症後10日目の血清から毒素は検出されなかった。



愛媛県立衛生研究所　鍋屋孝司　矢野玲子　篠原信之　井上博雄
松山赤十字病院小児科　横山俊之　西林洋平　永井信也
大阪府立大学農学部　阪口玄二


表１．糞便中のボツリヌス毒素および菌の検出結果
表２．蜂蜜からのボツリヌス毒素および菌の検出結果