恙虫病リケッチア（Rt）は株間の交差反応が強く，一般の免疫血清では型別が困難なケースがしばしば認められる。そこで著者らは標準株（Gilliam，Karp，Kato）に対するモノクローナル抗体を作成し，静岡県内で分離されたRt株の型別を試みたので，その概要を述べる。

　得られたモノクローナル抗体はGilliam株に対するものが３系統（３Ｈ５，１Ｅ１，３Ｂ６），Karp株に対するものが２系統（３Ｃ９，３Ｇ１），Kato株に対するものが３系統（１Ｄ12，１Ｈ12，３Ｃ８）の合計８系統であった。標準３株を抗原とした間接蛍光抗体法によりモノクローナル抗体の反応性をみると，抗Gilliam-３Ｂ６（Katoとも反応）および抗Kato-１Ｈ12（Gilliamに弱く反応）以外はすべてホモの抗原にのみ反応した。

　型特異的と思われる３種類のモノクローナル抗体（抗Gilliam-３Ｈ５，抗Karp-３Ｃ９，抗Kato-１Ｄ12）を用いて，間接蛍光抗体法により分離株との反応性を検討した。未処理の有毛マウスを用いて分離した患者由来の２株，野ネズミ由来の82株はすべてKarp型であることが確認された（表１）。また，免疫抑制剤であるサイクロフォスファミドを投与した有毛マウスを用いて分離された患者由来の６株，タテツツガムシ由来の１株，アカネズミ由来の３株は型別に用いたいずれのモノクローナル抗体にも反応がみられなかった。そこで，これらの10株について，８系統のモノクローナル抗体との反応性を調べたところ，患者由来の２株は８系統すべてのモノクローナル抗体に反応しなかったが，他の８株は型別に用いなかった抗Gilliamモノクローナル抗体（１Ｅ１，３Ｂ６）の少なくとも１系統と反応した（表２）。

　今回型別が実施された94の分離株はKarp型84株，Gilliam株に近縁なもの８株，すべてのモノクローナル抗体に反応しなかったもの２株に分類された。Karp型と同定された84株のRtはすべて未処理の有毛マウスに対し病原性を有していたが，免疫抑制マウスを用いて分離され，同定不能となった10株は未処理の有毛マウスに対して病原性を示さなかった。したがって，静岡県における恙虫病はマウスに対し強病原性のKarp型のRtおよびマウスに対し病原性が弱く，標準株の３種類とは抗原性を異にする複数のRtによって引き起こされていることが示唆された。

　最近，標準株とは抗原性の異なる株が各地で多数分離されているが，これらの株の大半はGilliam株あるいはKarp株に近縁のものなので，免疫血清を使用した場合，最も強く反応した型と同定されてしまう可能性がある。しかし，モノクローナル抗体を使用することにより今回の成績のように確実に標準型に属するものか否かを判別することができる。モノクローナル抗体は，恙虫病リケッチアの型別を容易にするだけでなく，今後国内に分布するRtの抗原性を解析していく上で精度の高い手法として役立つものと思われる。



静岡県衛生環境センター　川森　文彦，秋山　真人，杉枝　正明，神田　隆，赤羽　荘資


表１．未処理の有毛マウスを用いて分離した恙虫病リケッチアの型別
表２．型別不能となった分離株の全モノクローナル抗体に対する抗体価（ＩＦＡによる）*