青森県におけるライム病の実態を把握することを目的に，県内に棲息するマダニ類を対象にボレリア検索を行った。マダニの捕獲は1991年のネコ咬着マダニを除いて1990年５月下旬から６月下旬と1991年６月下旬から７月上旬の２回にわたって，県内５地域の標高20m〜200m地点における森林伐採跡地や林道の草地を対象に，ハタズリ法により行った。検査には捕獲マダニのうち，検査時まで生存していた240匹の成ダニ（ヤマトマダニIxodes ovatus: Io略188匹，シュルツェマダニI. persulcatus: Ip20匹，タネガタマダニI. nipponensis: In２匹，チマダニ属Haemaphysalis spp.: Hsp30匹）を用いた。マダニからの中腸等の採取およびボレリアの培養は佐藤ら，森の方法に従って行った。

　結果は表１に示すごとく，検査したすべての地域のダニからライムボレリア（Borrelia burgdorferi: B.b.略）類似の株が分離された。ネコ咬着由来の２株を含めた種別の分離率はIo26％（188匹中48匹），Ip15％（20匹中３匹）であった。In Hspからは分離されなかった。

　本県ではまだ患者は確認されていないが，B.b.の媒介種といわれるIpのみならず，本県での優占種であるIoも保有していることは患者がいつ発生してもおかしくない状況にあるといえる。

　分離ボレリアの抗原性を調べるため，1990年の分離株のうち，純培養できたIo由来２株，Ip由来２株と標準株Ｂ31の計５株をＳＤＳ-ＰＡＧＥ法で泳動し，蛋白構造を比較した。その結果，いずれの株も大局的には類似のパターンを示したが，詳細には株間で差異が認められるものもあった。そこで，この５株をマウスの腹腔へ免疫して抗マウス腹水を作製，各抗原と免疫ペルオキシダーゼ（ＩＰ）法により交差試験を行った。

　成績は表２に示すごとく，すべての分離株はＢ31とは抗原性が大きく異なるばかりではなく，分離株間でも抗原の多様性が示唆された。このことはＩＰ法や蛍光抗体法に使用する抗原の選択には充分な注意が必要であることを示している。また，同抗体，抗原を用いたウエスタンブロット（ＷＢ）法では各抗体の多くはホモの株の31〜32ＫＤａ蛋白とは強く反応するのに対し，ヘテロの株の31〜32ＫＤａ蛋白とは反応は弱かった。すなわち，31〜32ＫＤａ蛋白は株特異的抗原であることを示している。

　一方，41ＫＤａ蛋白に対してはホモ，ヘテロに関係なく，いずれの抗体とも同じ程度で反応した。これは41ＫＤａ蛋白が群共通抗原であることを示している。

　以上のことから，41ＫＤａ蛋白を指標とするＷＢ法は抗原の差異による抗原陽性者の見逃しの可能性が少ないと考えられる。現在，ヒト血清を用い本法の有用性について検討中である。



青森県環境保健センター　佐藤　允武


表１．青森県内に棲息するマダニからのボレリア分離
表２．免疫ペルオキシダーゼ（ＩＰ）反応による交差性