麻疹は通常臨床症状から容易に診断でき，従来の方法ではウイルス分離に時間がかかり，分離率も低いことから，現在，感染症サーベイランス事業において病原体検出の対象疾患となっていない。しかしながら，1992年３月以降，本県の検査定点，あるいは他の機関の医師から，「ワクチン接種歴があるにもかかわらず麻疹様症状を呈する患者や，風疹あるいは他の疾患との鑑別がつきにくい症例がある」との情報が得られたため，ウイルス分離を試みたところ，７名の患者からウイルスが分離できたので報告する。

　方法

　１）検体：分離材料として３月初旬から６月初旬までに麻疹様疾患と診断された患者10名および，麻疹様の症状を示すが診断の困難であった患者１名の計11名から採取された咽頭ぬぐい液11検体を用いた。なお，患者のワクチン歴は可能な限り記載してもらった。

　２）細胞：当初，従来通りＶｅｒｏ細胞を用いて分離を試みたがＣＰＥの出現が遅く，また，継代中にＣＰＥが消失する例がみられたため，国立予研の小船富美夫先生より分与頂いたＢ95ａ細胞を用いて再度分離を試みた。

　３）分離方法：増殖培地（10％ＦＣＳ加ＰＲＭＩ1640培地）で増殖させたＢ95ａ細胞を常法どおり96穴マイクロプレートに播き単層細胞になったところで培地を除き，検体を20μlずつ接種後，37℃30分間吸着させ，維持培地（５％ＦＣＳ加ＲＰＭＩ1640培地）を100μl加え37℃５％ＣＯ2インキュベーター内で培養した。なお，Ｂ95ａ細胞は強めのピペッティングで容易に分散できるため細胞の継代時にトリプシンを使用せずに済んだ。

　４）判定：麻疹ウイルスに特有のＣＰＥ（合胞体）を示したものを分離陽性（＋）とし，デンカ生研の麻疹ウイルスＦＡ試薬を用いて確認した。なお，盲継代を２回行ってもＣＰＥの出現しなかったものは分離陰性とした。

　結果

　表に示すとおり11名の患者中７名から麻疹ウイルスが分離され，うち３名はワクチン歴のはっきりした患者からで，１名は他の疾患と鑑別がつきにくい例であり，ウイルスを分離できた患者の年齢層には幅があった。また，Ｂ95ａ細胞では，早いものは接種後２日目で，遅いものでも４日目でＣＰＥを確認でき，Ｖｅｒｏ細胞と比べて容易にウイルスを分離することができた。今回，患者の血清を入手できず，抗体の確認をしていないが，ワクチン歴のある患者でウイルスが分離されていることなどから，今後，分離ウイルスの性状等を様々な角度から検討していく予定である。なお，サーベイランス事業の病原体検索において，臨床的に紛らわしい場合は，病原体検出対象以外の疾病についても積極的にウイルスの検出を行うことが地研と定点との連携を強めていく上で重要と思われた。



宮崎県衛生環境研究所　吉野　修司，大浦　恭子，山本　正悟，八木　利喬


宮崎県における麻疹ウイルスの分離状況