ライム病は，川端らが我が国における初発症例（1986年）を報告して以来，種々材料から本症の病原体であるボレリア（Borrelia burgdorferi）の検索が試みられている。これまでに，これらからの検出報告は，マダニおよび野生動物についてのみであった。しかし最近，宮本ら （本月報Vol. 13，�ｂU，1992） は，北海道における患者からのボレリアの検出例（５事例，1990および1991年）を報告した。現在までに，北海道以外での患者からの検出報告例は見当たらない。

　私たちは1989年から患者（疑いも含む）血液からのボレリア検出を試みたが，いずれも検出されなかった。そこで，1992年から遊走性紅斑（以下ＥＭと略す）の皮膚組織の培養も加えて検出を試みた結果，２名の患者からボレリアを検出したので，その概要を紹介する。

　1992年は10名の被験者があり，検体は血液が３例，ＥＭ辺縁部組織６例およびマダニ刺傷部と血液１例であった。検体の採取は，あらかじめ医療機関へ送付しておいたＢＳＫ�U培地（ＲＦＰ30μg/ml含有）にそれぞれの検体を無菌的に採取し，当所へ送付願った。培養は30℃で行い，ほぼ１週間ごとに暗視野顕微鏡によりボレリアの確認を行った。B. burgdorferiの確認は，モノクローナル抗体Ｈ5332により行った。なお，血清抗体価の測定もＢ31株を抗原としたＩＦ法により併せて行った。

　ＥＭからB. burgdorferiが検出されたライム病患者２名の経過を表に示す。患者２名はいずれも山地（標高それぞれ約1,600m，1,800m）を散策した際にマダニ刺傷があったと思われ，典型的なＥＭは出現したが，他のライム病を疑う臨床症状は少なかった。症例１の患者はマダニ刺傷のあった部位以外にもＥＭを認めたが，二次的ＥＭなのか，この部位にもマダニ刺傷があったのかは不明であった。両者共にミノマイシン投与により約１週間後にＥＭは消退した。

　ＥＭ辺縁部の生検からのボレリア検出は，それぞれ培養16日目，22日目に確認され，マダニからの検出例とほぼ同様な傾向であった。２例共に雑菌汚染があり，動物接種による純培養化を試みている。また，分離菌株を抗原として，患者血清抗体価の測定も準備している。Ｂ31を抗原として血清抗体価を測定したが，症例１では最高40倍，症例２では10倍以下といずれも有意の抗体上昇は認められなかった。分離菌株は，いずれもＨ5332に反応し，B. burgdorferiと確認されたことから，両患者はライム病と診断された。

　以上，ＥＭからのボレリアの検出例を紹介したが，ライム病の診断には，この様にボレリアの検出が最も有効な方法と思われる。しかし，培養に長期間を要することから，ＰＣＲ法などの迅速診断の開発が望まれる。今後，該菌およびマダニ分離菌株などを用いて，長野県における流行菌株の検討を試みたい。



長野県衛生公害研究所　村松　紘一，山岸　智子


マダニ刺傷患者からのボレリアの検出症例